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上海ELISA试剂盒的检测范围和实验应该注意的问题

点击次数:58 发布时间:2019-07-25

  上海ELISA试剂盒的检测范围和实验应该注意的问题
  ELISA实验中应注意的问题有:样品稀释、试剂盒平衡、样品与试剂混合、样品添加、培养等。上海ELISA试剂盒具有准确度高、灵敏度高、特异性强等优点,深受广大用户的喜爱。
  上海ELISA试剂盒的应用种属、检测样本的种类:除试剂盒特别说明外,一般不同种属不能通用。常见待测样本种类有:血清和血浆(不同抗凝剂),细胞上清,和细胞裂解液,试剂盒中不同样本的稀释液不混用;
  上海ELISA试剂盒的检测范围:也就是标曲范围,特别要注意待测样本浓度是否落在标曲范围内,对于浓度很高的样本,可以先进行预实验摸索到比较好的稀释倍数后再大量测定样本。
  elisa中的稀释线性及回收率:
  a.稀释线性一般指样本稀释线性,是将样本梯度稀释下来,看各稀释梯度浓度是否成线性;参考样本稀释线性可以选择样本的稀释倍数;
  b.稀释线性也有做加标稀释线性的情况,加标稀释线性是将标准品加入样本中测定加入的标准品浓度测定是否准确;同样也是确定待测样本稀释倍数的参考指标。一般线性和回收率的范围在80%-120%比较合适;
  上海ELISA试剂盒的其它指标:
  a.灵敏度:试剂盒能够检测到的样本最低浓度的能力,如果待检指标含量很低,需要选择高灵敏度的ELISA试剂盒;
  b.板间和板内的变异系数(CV%):反映板内和不同板之间是否均匀,CV%一般小于10%比较好。
  试剂盒的有效期:试剂盒的有效期一般是半年至一年,样本准备时间需要考虑到试剂盒的有效期。
  ELISA法已被广泛应用于各种抗原和抗体的测定中。ELISA的测定有许多影响因素。除了正常的反应外,在检测过程中经常会出现一些错误的结果。导致ELISA测定结果错误的主要原因是:样品因素;试剂因素;操作因素。
  上海ELISA试剂盒样品稀释
  常用产品的稀释倍数由大量试验确定,以确保试验的敏感性和特异性。酶联免疫吸附反应(ELISA)是一种高度敏感的反应。如果不稀释血清,则不可避免地会产生强烈的非特异性反应和假阳性。
  二.工具包平衡
  所有ELISA试剂和试纸条应在试验前与室温(约25℃)保持平衡,并应在室温下放置20分钟以上。过短的平衡时间会导致试剂混合不足、孵育时间缩短和ELISA反应不足。在冬季低温下,试剂盒可放置在37℃处20分钟。
  三.样品和试剂的混合
  上海ELISA试剂盒样品在稀释前后必须充分混合,所有试剂必须在加入样品前摇匀,以确保试验的均匀性。

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