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ELISA检测试剂盒使用血清提取蛋白的制作办法

点击次数:208 发布时间:2019-06-25

   ELISA检测试剂盒使用血清提取蛋白是从血清中提取的蛋白质,适用于食物工业的食物增加剂和医药制剂。
  通常提取蛋白质的办法是离心分离,除掉血浆,使二价铁血红素酸化,并将其扫除。但是这种办法产量很低(100毫升血液仅可提取蛋白质约10)克。
  为了进步蛋白质得率,选用新的办法,即用每分钟2500~3000转的速度在15~30分钟内将血液进行离心分离,使醋酸和氯化钠的混合物(比值为2∶1~4∶1)酸化。在温度90~110℃下加热5~15分钟。冷却,再增加yi醚。
  制作办法:
  取经过安稳的血液,作离心分离15~30分钟,每分钟转速为2500~3000转。从而获得固形物,去除血浆,用水使固形物沉渣溶解。置血红素于培养基中。为了使培养基酸化而使血红素分子中的二价铁血红素和血球蛋白的结合体分离预先制备好醋酸和氯化钠的混合物并将它加热到90~110℃。混合时将固形物的溶血产品缓慢地增加到加热的混合物中。从头把温度逐渐地升高到沸点,煮沸5~15分钟,以便使结合体彻底分离,接着将混合物逐步冷却到室温。
  为了使二价铁血红素溶解并消除,进口ELISA检测试剂盒在混合物中按溶物产品比值2∶1~5∶1增加yi醚。这时提取出来的蛋白质呈白棉絮状。将溶液过滤,再用yi醚清洗。
  100毫升血中提取的蛋白质产品相当于14.4克。使用这种办法,每100毫升的血液可进步蛋白质得率45。
  根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或赤色,我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl,实际上,血红蛋白含量的凹凸对血清并无直接影响,这个指标的意义在于能体现出采血过程的谨慎规范程度,杰出的操作能下降血清的溶血。
  国产血清的基本上是采血后立刻离心收集,所以很少会有溶血,表现出亮堂的蜡黄色。进口胎牛血清或多或少总有点溶血,因为胎牛血清凝血功用差,红细胞简单破裂。

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