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如何根据实验物种及待检样品性质来选择科研ELISA试剂盒

点击次数:72 发布时间:2018-11-26

如果实验君的实验样品为人、小鼠或大鼠样品,那么要选择一个合适的/相对容易,但如果您的实验样品来源于其他物种如鸡、牛、猴等,则市面上能提供的试剂盒种类却很少。且不可轻信能提供近万种试剂盒,覆盖多物种的供应商。但如果又非要检测这些物种的指标时,最好要对待检物(如有种属差异性)进行同源性分析以及试剂盒的种属交叉反应数据。对于样品类型而言,一般的商业化试剂盒都经过血清、血浆和细胞培养上清液的验证。在选择试剂盒时,最好要详细阅读说明书,比如血浆样本抗凝剂的使用是否与试剂盒兼容。另外,在某些情形下样品中会存在干扰因素比如溶血血浆、高脂肪含量的样品、人抗鼠抗体(HAMA)、细胞培养上清中含胎牛血清等。因此需根据样品来选择试剂盒,必要时还要根据样本来适当优化。或在样品收集前,最好先阅读一些可靠供应商试剂盒的说明书或直接咨询。如果您的样品为组织或细胞裂解物,则需要更谨慎的选择试剂盒。市面上大多数的商业化试剂盒没有经过多种来源组织样本的验证。这需要实验君能理解不是所有试剂盒所用的抗体对,都能特异的从一堆裂解物蛋白中特异检出您的目的蛋白,还要考虑组织样品的基质效应(Matrix Effect)等。但如果实验君要了解组织样品的制备问题,我们另起一文来总结。
根据样品中检测物水平来选择科研ELISA试剂盒
如果实验君对于样品中待检物的水平没有任何可参考的数据,最好选择宽动力学检测范围的试剂盒。如果样品中待检物的含量很低,建议选择高灵敏度的试剂盒。为了降低基质效应,有必要用稀释液至少做2倍稀释。如果样品中待检物含量远超过试剂盒的检测范围(标曲范围), 也需做适当的倍数稀释。在最后计算结果时,需乘以相应的稀释倍数。
根据样本可获得性来选择科研ELISA试剂盒
通常而言,商业化试剂盒的样品用量都在50ul或100ul, 但也有一些供应商的试剂盒对样品的用量要求可少至10ul。如果您的样品很珍贵或较难获取,则需要认真考虑试剂盒对样品用量的要求。如果样品量少,且要做多因子检测时更需谨慎。 

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